Es el protagonista y verdadero conductor de la serie. Se trata de un perro ‘maravilla’ capaz de mostrar sentimientos y actitudes propias de un niño, con un gran talento para los asuntos criminales y un buen olfato. Juega y hace travesuras y se venga si siente que se han burlado de él.
Sabe ser humano, hasta el extremo de comprender el dolor que una persona puede sentir, no sólo porque la vea llorar y se acerque para consolarla poniéndole su pata sobre la mano, sino también porque sabe quién sufre.

Ahora se encargará de ayudar a su nuevo inspector en Roma, Lorenzo Fabbri y tendrá que rescatarlo en más de una ocasión pero todo, en un ambiente totalmente distinto al que estaba acostumbrado. Rex protege tanto a su nuevo dueño, que incluso recela de todas las mujeres que muestran interés por él.

Comisario italiano de 35 años y nuevo compañero de Rex en Italia. Gran amante de la música, especialmente la clásica y del rock de los años 70.

Se caracteriza por ser un hombre fascinante, tenaz e irónico por lo que, al principio, podría parecer una persona brusca. Con personalidad fuerte, gran intuición y un sentido de la justicia, se coloca muchas veces del lado de los más débiles, lo que le provoca más de un problema con sus superiores. Es tímido y lleva una vida relativamente "normal", lo que se pudiera catalogar como ‘aburrida’, hasta que llega Rex, quien se convertirá en su mejor amigo.

Es un inspector que trabaja con Lorenzo desde hace 5 años ejerciendo labores de oficina. Por diversas circunstancias, Fabbri se lo lleva a trabajar con él y le integra como parte importante de su equipo. Morini es el blanco preferido de las bromas del comisario. No obstante, lo respeta mucho y tiene una actitud proteccionista con él.

Tiene 55 años de edad y es el jefe de Lorenzo. Es un hombre de gran carácter, seguro de sí mismo y honesto, pero ambicioso. Su actitud hacia Lorenzo es un poco ambigua, pues aprecia su habilidad como investigador de crímenes, pero no le gusta que a menudo se crea superior a él. Además, Gori odia a los animales en general, especialmente a los perros.

Es una mujer atractiva, de 28 años de edad y soltera. Pertenece al equipo de forense de la policía romana. Martelli siempre es la primera en llegar a la escena del crimen, situación que propicia el encuentro con Lorenzo. Se siente atraída por él, pero al parecer, el comisario no se da cuenta y ella hará todo por llamar su atención. A pesar de las apariencias, es una chica muy amable e insegura en su vida privada, pero muy eficiente en el trabajo.

Es una madre italiana que quiere a su hija Gioia por encima de todas las cosas. Un día, su hija comete un error y Altobelli no duda en llevar a cabo una medida desesperada y radical para ocultarlo. Cuando es detenida por el inspector Fabbri, confiesa su delito y en el momento que su vida corre peligro, Rex no duda en salvarla.